中藥材造假的現(xiàn)象自古有之。近年來,由于中藥材種類繁多、來源復(fù)雜以及受市場利益的驅(qū)使,中藥材品種混淆、摻偽現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生,不僅導(dǎo)致中藥材的聲譽(yù)受損,而且也對患者的生命安全造成了威脅。以白鮮皮為例,許多患者由于服用了與植物白鮮皮相似的偽品中藥材加工成的飲片,導(dǎo)致藥物性肝損傷。
因此,識(shí)別藥材真假偽劣尤為重要。然而,許多混偽品與藥材形態(tài)相似,用傳統(tǒng)的理化鑒定方法區(qū)別較為困難。人們亟待發(fā)現(xiàn)一種能準(zhǔn)確、快速、可靠地鑒定藥材的新方法,在此背景下,中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所所長陳士林研究員帶領(lǐng)科研人員研發(fā)出一種新的中藥材鑒定方法——中藥材DNA條形碼鑒定技術(shù)。
為中藥材量身定做“基因身份證”
中藥材傳統(tǒng)鑒定方法主要包括基原鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定和理化鑒定。
這些鑒定方法各有側(cè)重。基原鑒定應(yīng)用植物、動(dòng)物或礦物的形態(tài)學(xué)和分類學(xué)特征,對中藥材的來源進(jìn)行指認(rèn),因而對所鑒定材料的完整度有較高的要求;性狀鑒定是對藥材宏觀性狀的感官鑒定;而顯微鑒定主要依據(jù)的是藥材微觀構(gòu)造和特征;理化鑒定則是根據(jù)藥材的某些物理性質(zhì)或化學(xué)性質(zhì),采用物理或化學(xué)手段,對其進(jìn)行真?zhèn)舞b別。
“不過,這些方法在一些近緣種、易混種的中藥材鑒定上存在局限。此外,傳統(tǒng)鑒定方法依賴經(jīng)驗(yàn),對鑒定人的專業(yè)素質(zhì)要求較高。由于相關(guān)人才培養(yǎng)周期長,很多地方的老藥工已經(jīng)很少,面臨人才斷代的困境。”中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所所長陳士林告訴科技日報(bào)記者,中藥材DNA條形碼鑒定技術(shù)很好地解決了這一難題,讓中藥材鑒定不再依賴藥工。
陳士林介紹,DNA條形碼的概念由加拿大動(dòng)物學(xué)家保羅·赫伯特首次提出,是指使用一段較短的、標(biāo)準(zhǔn)的、易擴(kuò)增的DNA片段對物種進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化的鑒定。而中藥材DNA條形碼主要記錄的是現(xiàn)行分類系統(tǒng)下代表中藥材物種的DNA序列信息。中藥材DNA條形碼鑒定技術(shù)就是適用于中藥材物種鑒定的DNA條形碼,通俗來講,就是為中藥材量身定做的“基因身份證”。中藥材要獲得屬于自己的“基因身份證”,需要利用分子生物學(xué)手段,進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增和序列測定、序列分析等。
陳士林認(rèn)為,相比傳統(tǒng)的中藥材鑒定方法,中藥材DNA條形碼鑒定技術(shù)具有多方面優(yōu)勢。
“該技術(shù)具有通用性,只需選用一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)基因片段即可對絕大部分物種進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定;鑒定過程更加快速;重復(fù)性和穩(wěn)定性高;實(shí)驗(yàn)過程標(biāo)準(zhǔn)、操作簡單;可通過互聯(lián)網(wǎng)和信息平臺(tái)對現(xiàn)有物種序列信息進(jìn)行集中統(tǒng)一管理;可有效緩解分類鑒定人才缺乏的現(xiàn)狀。”陳士林說。
近年來,DNA條形碼鑒定技術(shù)在中藥材鑒定中已得到成功應(yīng)用,擺脫了傳統(tǒng)形態(tài)鑒定方法依賴長期經(jīng)驗(yàn)的束縛。陳士林強(qiáng)調(diào),該技術(shù)有利于標(biāo)準(zhǔn)化,是中藥分子鑒定方法學(xué)上的創(chuàng)新。
不過,這項(xiàng)鑒定技術(shù)也存在短板。陳士林解釋:“由于DNA條形碼鑒定技術(shù)主要在核酸層面對物種進(jìn)行鑒定,不包含物種的性狀和物理化學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)信息。所以,對于在炮制或加工過程中DNA降解的藥材鑒定能力有限。另外,DNA條形碼不能鑒定礦物藥材。”
讓中藥材鑒定更趨標(biāo)準(zhǔn)化
近年來,國內(nèi)相關(guān)團(tuán)隊(duì)正在推動(dòng)中藥材DNA條形碼鑒定技術(shù)體系的建立。
比如,陳士林本草基因組學(xué)團(tuán)隊(duì)在大樣本量中藥材基因序列篩選研究基礎(chǔ)上,出版了《中國藥典中藥材DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)序列》和《中藥DNA條形碼分子鑒定》,建立了中藥材DNA條形碼分子鑒定體系。
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